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新聞詳情
美國哈希（便攜式分光光度計）的蛋白質的直接定量
日期：2024-05-18 22:36
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摘要：
這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。選擇Warburg 公式，美國哈希（便攜式分光光度計）可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應的換算方法，將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單，先測試空白液，然後直接測試蛋白質。由於緩衝液中存在一些雜質，美國哈希（便攜式分光光度計）一般要消除320nm 的“背景”信息，設定此功能“開”。與測試核酸類似，要求A280的吸光值至少大於0.1A，*佳的線性範圍在1.0-1.5 之間。實驗中選擇Warburg公式顯示樣品濃度時，發現讀數“漂移”。這是一個正常的現象。事實上，隻要觀察A280的吸光值的變化範圍不超過1%，表明結果非常穩定。漂移的原因是因為Warburg公式吸光值換算成濃度，乘以一定的係數，隻要吸光值有少許改變，濃度就會被放大，從而顯得結果很不穩定。蛋白質直接定量方法，適合測試較純淨、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對於比色法來說，速度快，操作簡單；但是容易受到平行物質的乾擾，如DNA的乾擾；另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。
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